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三氯片消菌实验的过程及结果分析

  一、三氯片消菌实验的过程:

  1、物体表面现场消毒实验:

  (1)随机取物体表面,用25厘米的面积标记两个区域?带规格板,一个用于消毒前取样,一个用于消毒后取样。

  (2)消毒前,将无菌棉签在5ml稀释管中润湿,涂片和样本块1,水平和垂直来回8次。采样后(采样区域为30个不同区域),将棉签的采样端在无菌操作中切入原始稀释管,摇动20秒,作为阳性对照样品使用。

  (3)将消毒剂喷洒在物体表面。作用5min后,擦拭含有5ml中和剂的试管内的无菌棉,取样消毒区域,将取样棉签切入原中和剂管内,作为消毒组的样本。

  (4)实验结束后,将同一批稀释液和中和剂1ml接种到培养基中作为阴性对照组。

  (5)阳性对照组、阴性对照组、消毒组各取1ml样品,琼脂灌注法接种平板,每个样品接种2片,在37℃恒温培养箱中培养48h,观察终端结果。

  2、三氯片悬液定量的消菌实验:

  (1)取无菌试管,加入0.5ml10°CFU/ml菌悬液,再加入0.5ml有机干扰物,混匀,置于(20±1)℃水浴中5min,加入4.0mL三氯泡腾片,快速混匀,计数时间。作用时间结束后,吸取上述实验菌与三氯泡腾片的混合物0.5ml,加入4.5ml中和剂中,作用10min,分别吸取0.5ml,放入两个平板中,计数活菌数。然后按10倍梯度稀释,分别吸取0.5ml,置于两个平板中,计数活菌数。

  (2)阳性对照:取无菌试管,加入0.5ml10°CFU/ml菌悬液,再加入0.5ml有机干扰物,混匀,置于(20±1)℃水浴中5min,用移液枪吸取4.0mL标准硬水,注入,混匀,按10的倍数稀释,分别从10°F和10cfu/ml试管中吸取0.5ml,放入两个平板Ⅲ中,计数活菌数。

  (3)倒入15ml冷却到45℃左右的培养基,手动摇匀。凝固后,将金黄色葡萄球菌和大肠杆菌样品放入37℃培养箱中,48h后观察实验结果;将白色念珠菌样品置于28℃恒温箱中,72h后观察实验结果。

  二、结论:

  上述三氯片消毒泡腾消菌实验结果表明,当氯含量为500mg/L时,对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌的消菌时间仅为2min。表面试验结果表明,氯含量为500mg/l的消毒剂对自然菌也有良好的杀灭效果。